醫(yī)藥工業(yè)潔凈室與其他工業(yè)潔凈室有所不同，特別是無菌生產(chǎn)，不僅要控制空氣中一般的懸浮狀態(tài)的氣溶膠粒子，還要控制活微生物數(shù)，即提供所謂的“無菌”環(huán)境（無菌室）。當(dāng)然“無菌”是相對的，它可以用無菌保證率STA（Sterilty Assurance Level）來表示。

醫(yī)藥工業(yè)上獲得無菌空氣的方法大致可以分為兩大類：

1、滅菌

利用加熱（干熱、濕熱）、化學(xué)試劑（如甲醛、環(huán)氧已烷）、臭氧、射線（如紫外燈照射）等方法，使空氣中細(xì)菌的蛋白質(zhì)變性以滅菌。

2、除菌

利用過濾介質(zhì)（如各類空氣過濾器、高效過濾器）或靜電除塵法將空氣中塵埃、雜菌、予以捕集截留。

事實上，工業(yè)應(yīng)用的除菌方法往往也不是單一的，而是兩者的結(jié)合，對于流動的空氣（如HVAC系統(tǒng)、壓縮空氣）常采用過濾介質(zhì)除菌，而對于靜止環(huán)境內(nèi)空氣，常采用滅菌法，用于無菌室、培養(yǎng)室、傳遞窗、衣服等的滅菌。

利用過濾介質(zhì)除菌我們已在前面HVAC系統(tǒng)驗證中作過介紹。按理說，順HVAC系統(tǒng)中，送入經(jīng)高效過濾器過濾的空氣，可以使房間的活微生物數(shù)控制在規(guī)定的范圍內(nèi)。其實不然，實際生產(chǎn)時，由于機器的運行、人員的進出，建筑物的表面均會產(chǎn)生塵粒，從而滋生細(xì)菌并極易再吹落，特別是人員的污染幾乎是唯一的細(xì)菌來源，一個人每小時約散發(fā)1000只死皮細(xì)胞（等價于20μm大小的粒子）因此無菌室的室內(nèi)建筑材料、潔凈服裝的洗滌、晾干、包裝必須在潔凈環(huán)境中進行；無菌衣要經(jīng)高溫消毒滅菌；人員、設(shè)備、儀器進入無菌室應(yīng)伯嚴(yán)格的消毒滅菌處理；（人手需用消毒藥物或噴灑）；定期進行室內(nèi)消毒滅菌操作。各國GMP均對潔凈室中空氣浮游菌及表面細(xì)菌有嚴(yán)格的規(guī)定，如USP建議潔凈環(huán)境中的細(xì)菌允許值如表6所示：

由于藥品生產(chǎn)時，在潔凈室的地面、墻面、頂棚、機器、人體衣服表面可能有活微生物粒子存在，當(dāng)溫濕度合適時，細(xì)菌即在這些表面繁殖，并不時被氣流吹散到室內(nèi)。因此潔凈室（特別是無菌室）一般不按排三班生產(chǎn)，每天必須有足夠時間用于清潔、消毒。

表6    細(xì)菌允許值

3、消毒的方法

常見的表面消毒滅菌方法有紫外燈照射，臭氧接觸，過氧已酸、環(huán)氧已烷等氣體熏蒸、消毒劑噴灑等。

清潔和滅菌是驅(qū)除微生物污染的主要手段，但必須保證清潔及滅菌的徹底性，因此藥品生產(chǎn)企業(yè)必須制定清潔與滅菌規(guī)程，并定期進行驗證，以確證清潔與滅菌劑及濃度、消毒設(shè)備、消毒時間以及最后的環(huán)境監(jiān)測。

A、紫外燈消毒滅菌

紫外線滅菌燈（簡稱紫外燈）在其它消毒方法未使用之前，為藥品生產(chǎn)企業(yè)普遍采用，主要用在潔凈工作臺、層流罩、物料傳遞窗、風(fēng)淋室乃至整個潔凈房間的消毒，由于目前已有了其它好的滅菌方法，潔凈室內(nèi)是否安裝紫外線殺菌力最強，紫外線波長為136~390nm,以253.nm的殺菌力最強，但紫外線穿透力極弱且存在照射死角，只適用于表面殺菌；

B、臭氧消毒

臭氧廣泛存在于自然界中，雷雨過后的空氣有一種“清新”感覺，是因為空中放電產(chǎn)生臭氧，消滅了空氣中的細(xì)菌和微生物凈化了空氣。人們在松林中也會嗅到臭氧的氣味，是因為松樹脂氧化產(chǎn)生臭氧。地球大氣圈的平流層中，由于受太陽紫外線的強烈照射以及宇宙射線的激發(fā)而產(chǎn)生臭氧，這里臭氧集中形成一個臭氧層，它象一把保護傘擋住太陽的紫外線和宇宙射線使地球的生物免危害?？茖W(xué)研究表明，臭氧具有強烈的殺菌消毒作用。

臭氧（O3）的消毒原理是：臭氧在常溫、常壓下分子結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，很快自行分解成氧（O2）和單個氧原子（O），后者具有很強的活性，對細(xì)菌有極強的氧化作用，臭氧氧化分解了細(xì)菌內(nèi)部氧化葡萄糖所必須的酶，從而破壞其細(xì)胞膜，將它殺死。多余的氧原子則會自行重新結(jié)合成為普遍氧分子（O2），不存在任何有毒殘留物，故稱無污染消毒劑。它不但對各種細(xì)菌（包括肝炎病毒、大腸桿菌、綠濃桿菌及雜菌等）有極強的殺滅能力，而且對殺死霉菌也很有效。

生產(chǎn)臭氧的原料主要是空氣和電能，一般通過高頻氧發(fā)生器（電子消毒器）來獲得。消毒時，直接將臭氧發(fā)生器置于房間中即可，空氣中使用臭氧消毒的濃度很低，只有幾個PPm，可根據(jù)房間體積及臭氧發(fā)生器的臭氧產(chǎn)量來計算得到。

臭氧消毒效果的驗證中需確認(rèn)和校正的臭氧發(fā)生器技術(shù)指標(biāo)主要有：臭氧產(chǎn)量、臭氧濃度和時間定時器，并通過驗證檢查細(xì)菌數(shù)來確定消毒時間。

C、氣體滅菌

對環(huán)境空氣的滅菌傳統(tǒng)做法是采用某種消毒液在一定條件下讓其蒸發(fā)產(chǎn)生氣體來熏蒸。消毒液有甲醛、環(huán)氧已烷、過氧已酸、石碳酸和乳酸的混合液等。

在所有的消毒液中，甲醛是最常用的，當(dāng)相對濕度65%以上，溫度在24～40℃時，甲醛氣體的消毒效果最好，但采用過多的甲醛，會因聚合而析出白色粉末附著在建筑物或設(shè)備表面，顧應(yīng)采用合理的消毒方法來進行。

甲醛消毒滅菌的氣體發(fā)生量、熏蒸時間、換氣時間等應(yīng)以驗證結(jié)果來最后確定。

D、消毒劑滅菌

潔凈室的墻面、天花板、門、窗、機器設(shè)備、儀器、操作臺、車、桌、椅等表面以及人體雙手（手套）在環(huán)境驗證及日常生產(chǎn)時，應(yīng)定期清潔并用消毒劑噴灑。常見的消毒劑有民丙醇（75%）、已醇（75%）、戍二醛、潔爾滅等。無菌室消毒我國藥廠傳統(tǒng)的方法是用甲醛熏蒸，國外藥廠認(rèn)為甲醛對人體有一定的危害，現(xiàn)普扁采用戍二醛（glutaraldehyde）噴灑，其方法是將戍二醛放在帶有時間控制的自動噴霧器中，在下班后或周未，無菌室內(nèi)無人時自動噴灑，其噴灑量可以調(diào)節(jié)，時間可以設(shè)定，在噴灑期間空調(diào)系統(tǒng)應(yīng)停止工作。

無菌室用的消毒劑必須在層流工作臺中，用0.22μm的濾膜過濾后方能使用。